RAPD 和 RFLP 的区别

目录:

Anonim

主要区别 RAPD 和 RFLP 之间的区别在于 RAPD 是一种 PCR,它通过使用短引物在大模板中扩增 DNA 的随机片段,而在 RFLP 中,一种或多种限制性内切酶消化 DNA 样品,产生限制性片段,然后通过凝胶电泳分离。 因此,RADP 只需要少量 DNA 进行检测,而 RFLP 需要大量 DNA。此外,RAPD是一个快速过程,可以检测1-10个基因座,而RFLP是一个较慢的过程,只能检测1-3个基因座。此外,RAPD 无法检测等位基因变异,而 RFLP 可以检测等位基因变异。

RAPD(随机扩增多态性 DNA)和 RFLP(限制性片段长度多态性)是分子生物学中的两种检测遗传标记的技术,这些遗传标记是利用同源 DNA 中的变异来检测短 DNA 序列。

遗传标记、PCR、RAPD、限制性消化、RFLP

什么是RAPD

RAPD 或随机扩增多态性 DNA 是一种基于 PCR 的快速检测 DNA 变异的方法。两个实验室(威廉姆斯等人,1990 年;威尔士和麦克莱兰,1990 年)独立开发了该技术。此外,RAPD 使用单一的、任意的引物来扩增许多离散的 DNA 产物。 RAPD涉及的步骤如下:

  1. DNA提取
  2. 随机引物扩增
  3. 凝胶电泳和标记的可视化

    图 1:RAPD 标记物的生菜多样性

此外,通过解析所产生的模式,可以生成特定 DNA 样本的半唯一 DNA 图谱。由于测定中使用的随机引物的特异性较低,因此每个随机引物可扩增的基因座数量相对较多。然而,RAPD是基因作图、群体遗传学、分子进化遗传学、动植物育种等领域的重要技术。而且,速度、成本、效率以及产生的标记数量对初学者来说至关重要。

什么是 RFLP

RFLP 或限制长度多态性是一种利用同源 DNA 变异的方法。这也是一种众所周知的方法,因为它的辨别力很强。然而,由于 RFLP 是一种非基于 PCR 的方法,它使用限制酶来生成基因组片段。此外,RFLP 检测个体之间限制片段长度的变化。 RFLP涉及的三个步骤如下:

  1. DNA 的限制性消化
  2. 凝胶电泳
  3. 通过特定探针和检测进行Southern印迹

    图 2:通过 RFLP 检测等位基因变体

RAPD 和 RFLP 之间的相似之处

RAPD 和 RFLP 的区别

定义

RAPD(随机扩增多态性 DNA)是指一种基于 PCR 的遗传变异识别技术,而 RFLP(限制性片段长度多态性)是一种分子遗传分析方法,它允许基于限制性内切酶切割的独特模式来识别个体。 DNA 的特定区域。

方法类型

方法

RAPD 涉及使用随机引物扩增基因组中的遗传标记,而 RFLP 涉及基因组 DNA 的限制性消化。

DNA数量

此外,RAPD 需要少量 DNA (10-50 ng) 进行分析,而 RFLP 需要相对大量的 DNA (2-10 μg)。

物种特异性

RAPD 使用对任何物种通用的随机引物,而 RFLP 使用不同的物种特异性探针。

效率

此外,RAPD 的步骤较少,是一个快速的过程,而 RFLP 的步骤较多,因为它是一个缓慢的过程。

可靠性

RAPD 不太可靠,而 RFLP 更可靠。

检测能力

RAPD 和 RFLP 的另一个区别是 RAPD 可以检测 1-10 个基因座,而 RFLP 只能检测 1-3 个基因座。

等位基因变异的检测

此外,RAPD 无法检测等位基因变异,而 RFLP 可以检测等位基因变异。

重要性

RAPD 是基因作图、群体遗传学、分子进化遗传学、动植物育种等领域的重要技术,而 RFLP 在基因分型、法医学、亲子鉴定、遗传疾病模式检测和疾病携带者检测方面具有重要意义.

结论

RAPD 是一种基于 PCR 的技术,用于检测基因组中存在的遗传标记。此外,它使用随机引物来扩增这些标记。由于 RAPD 是一种基于 PCR 的技术,它只需要少量的 DNA。此外,它是一种快速方法,但无法检测等位基因变异。相比之下,RFLP 是一种非基于 PCR 的方法,可检测基因组内的 DNA 变异。然而,它使用 DNA 的限制性消化、Southern 印迹和使用特定探针的序列检测。因此,这是一种更可靠的方法。但是,它需要大量的DNA。因此,RAPD 和 RFLP 之间的主要区别在于程序和重要性。

参考:

1. “随机扩增多态性 DNA (RAPD)”。国家生物技术信息中心,美国国家医学图书馆,可在此处获取。 2。 “限制性片段长度多态性(RFLP)。”国家生物技术信息中心,美国国家医学图书馆,可在此处获得。

图片提供:

1. Llull~commonswiki 假设的“RAPD” – 通过Commons Wikimedia 假设自己的作品(公共领域) 2. Kenneth.jh.han 的“RFLP-figure” – 通过Commons Wikimedia 自己的作品(CC BY-SA 3.0)

RAPD 和 RFLP 的区别