DNA变性和复性有什么区别

这 主要区别 DNA变性和复性之间的区别是 DNA 的变性是将 dsDNA 分离成单链的过程。但是，相比之下，DNA 的复性是形成碱基对的过程；也就是说，将互补的 DNA 链重新组合在一起。 此外，在 DNA 变性过程中氢键被破坏，但在 DNA 复性过程中互补碱基之间形成氢键。此外，影响 DNA 变性的主要因素是物理因素，如加热和超声处理，以及化学因素，如碱、甲酰胺和 DMSO。同时，影响复性的因素是溶液的离子强度、温度、时间、DNA 浓度和相互作用分子的大小。

简而言之，DNA的变性和复性是DNA中氢键断裂和重合成的两个过程。通常，它们在涉及 DNA 杂交的生物测定数量中很重要，例如膜杂交、微阵列、PCR 等。

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什么是DNA变性

DNA 的变性是将双链 DNA 分离成两条单链的过程。它是氢键断裂的结果。此外，双螺旋的变性可以通过两种方法发生；物理变性和化学变性。

物理变性

物理变性主要通过加热和超声处理完成。通常，高于 90°C 的高温会导致 DNA 变性。从技术上讲，这是通过提供足够的动能来破坏碱基对之间的氢键来实现的。随后，这导致 Watson 和 Crick 碱基对的破坏以及双链螺旋分离成两条单链。在此过程中，解链 DNA 双螺旋的特征温度称为解链温度 (Tm)。在此温度下，50% 的 DNA 被熔化。此外，Tm 随 G-C 含量的增加而增加，因为鸟嘌呤和胞嘧啶在碱基配对过程中形成三个氢键，而胞嘧啶和胸腺嘧啶仅形成两个氢键。通常，可以通过监测 260 nm 光的吸光度以分光光度法确定变性程度。

超声处理是另一种变性方法。在此，探针超声和超声浴是超声的两种技术。

图 1：PCR 中的变性和复性

化学变性

关于化学变性，尿素和甲酰胺等化学试剂的存在通过稳定嘌呤和嘧啶来加速变性。因此，它们降低了 Tm。例如，95% 的甲酰胺在室温下使 DNA 完全变性。此外，不同浓度的氢氧化钠和 DMSO 也会降低 DNA 的熔解温度。

DNA复性是什么

DNA 的复性是将两条互补的 DNA 链退火在一起的过程。最终，它会随着冷却而发生。从技术上讲，复性是通过互补碱基对之间氢键的重新形成而发生的，这反过来又将两条 DNA 链结合在一起形成双链 DNA。此外，可以通过监测吸光度来监测 DNA 的复性。通常，DNA 在 260 nm 处的吸光度会随着 DNA 复性而降低。此外，复性程度取决于 C0（变性前双链 DNA 的浓度）和 t（复性所需的时间）。

DNA 变性和复性之间的相似性

DNA变性和复性的区别

定义

DNA 的变性是指双链 DNA 通过氢键断裂而解旋，氢键将两条 DNA 链固定在一起。相反，DNA的复性是指碱基对的形成；也就是说，它是指 DNA 的两条互补链重新组合在一起。

会发生

DNA 变性产生单链 DNA，但 DNA 复性产生双链 DNA。

氢键

变性会破坏互补碱基对之间的氢键，但相反，复性会在互补碱基对之间形成氢键。

影响过程的因素

影响 DNA 变性的主要因素是物理因素，如加热和超声处理，以及化学因素，如碱、甲酰胺和 DMSO。另一方面，影响复性的因素是溶液的离子强度、温度、时间、DNA 浓度和相互作用分子的大小。

对吸光度的影响

变性会增加 DNA 在 260 nm 处的吸光度，但复性会降低 DNA 在 260 nm 处的吸光度。

对旋光度的影响

变性大大降低了 DNA 双螺旋的正旋光度，而复性则为 DNA 双螺旋带来了强烈的正旋光度。

对粘度的影响

变性显着降低了 DNA 的粘度，但复性大大增加了 DNA 的粘度。

结论

DNA 的变性是破坏 DNA 的氢键，从而将 DNA 双链体分离成两条单链 DNA 的过程。值得注意的是，它增加了 DNA 在 260 nm 处的吸光度，同时降低了正旋光度和粘度。相反，DNA 的复性是在两条互补的 DNA 链之间重新制造氢键，以形成双链 DNA 的过程。通常，它会降低 260 nm 处的吸光度，同时增加粘度和正旋光度。因此，DNA 变性和复性之间的主要区别在于 DNA 中氢键的行为及其影响。

参考：

1. 沙阿，里查。 “DNA 的变性和复性。”生物学讨论，2016 年 5 月 2 日，可在此处获取。2。王小芳等。 “用于 DNA 杂交的 DNA 变性和复性特征。”环境健康和毒理学卷。 29 e2014007。 2014 年 9 月 11 日，doi:10.5620/eht.2014.29.e2014007。