热胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化有什么区别

这 主要区别 冷热胰蛋白酶消化之间的区别在于 温胰蛋白酶化涉及在 36.50°C 下用温胰蛋白酶孵育组织，而冷胰蛋白酶化涉及在 4°C 下将组织浸泡在冷胰蛋白酶中，然后在 36.50°C 下孵育.此外，温胰蛋白酶消化对细胞的损伤很大，而冷胰蛋白酶消化可最大限度地减少温胰蛋白酶对组织的长期影响。

温热胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化是胰蛋白酶消化的两种技术，是一种用于原代细胞培养的组织酶解方法。在这里，胰蛋白酶是一种蛋白水解酶，可分解负责在培养物中粘附细胞的蛋白质。

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什么是温胰蛋白酶消化

温胰蛋白酶消化是在组织的酶促分解中使用的两种胰蛋白酶消化方法之一，同时为原代细胞培养做准备。它直接使用 36.50 °C 的温胰蛋白酶进行分解。首先，切碎的组织用 DBSS（解剖基础盐溶液）洗涤，然后加入装有温热胰蛋白酶的烧瓶中。解离的细胞在上清液中，每隔 30 分钟，搅拌烧瓶的内容物以回收解离的细胞。然后，将新鲜的胰蛋白酶加入混合物中。并且，该过程可以持续 3-4 小时，同时恢复解离的细胞。最后，可以通过离心从混合物中去除胰蛋白酶。

图 1：温胰蛋白酶消化

此外，温胰蛋白酶消化是最有效的细胞收获方法，因为它直接使用温胰蛋白酶。此外，此过程可以在几个小时内完成。然而，由于温胰蛋白酶的不利影响，活细胞的产量较低。

什么是冷胰蛋白酶消化

冷胰蛋白酶消化是胰蛋白酶消化的第二种方法。它不太有效，但会产生大量的活细胞。冷胰蛋白酶消化的缺点之一是完成该过程所需的时间。通常，准备好的组织首先在4°C下用冷胰蛋白酶浸泡约6-24小时。然后，将回收的组织与残留的胰蛋白酶在 36.50 °C 下孵育 20-30 分钟。重复移液有助于分散分离的细胞。

图 2：冷胰蛋白酶消化

然而，如前所述，在这种方法中，由于长时间接触热胰蛋白酶而导致细胞受损的风险很小。因此，该方法在培养中显示出提高的细胞活力。此外，由于没有离心，这种方法适用于传统实验室。然而，这种方法的主要缺点是它不能一次用于大量组织。

热胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化的相似之处

热胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化的区别

定义

温胰蛋白酶化是指在 36.50 °C 下用胰蛋白酶孵育组织，然后通过离心去除胰蛋白酶的两种胰蛋白酶化方法之一，而冷胰蛋白酶化是指涉及在 4 ℃下用胰蛋白酶浸泡的另一种胰蛋白酶化方法°C，然后在 36.50 °C 下与胰蛋白酶一起孵育。因此，这是热胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化之间的主要区别。

使用温胰蛋白酶 (36.50 °C)

热胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化之间的另一个主要区别是，组织在温胰蛋白酶消化中用温胰蛋白酶处理 3-4 小时，而组织用温胰蛋白酶孵育 20-30 分钟。

离心

离心是温胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化之间的另一个区别。离心在温胰蛋白酶化中是必不可少的，以从样品中去除胰蛋白酶，而在冷胰蛋白酶化中不需要离心。

效力

此外，温胰蛋白酶消化更有效，而冷胰蛋白酶消化效果较差。

重要性

此外，它们的意义是温胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化之间的另一个区别。温胰蛋白酶消化会对组织中的细胞造成损伤，而冷胰蛋白酶消除了温胰蛋白酶消化的不利影响。

活细胞的产量

活细胞的产量是温胰蛋白酶消化和冷胰蛋白酶消化之间的另一个区别。温胰蛋白酶消化产生较少量的活细胞，而冷胰蛋白酶消化活细胞产量较高。

时间

此外，温胰蛋白酶消化需要更少的时间来完成该过程，而冷胰蛋白酶消化需要更多的时间。

应用

结论

温胰蛋白酶消化是一种胰蛋白酶消化的方法，它使用36.50°C的温胰蛋白酶处理组织，以降解粘附蛋白。虽然它是一种有效的酶解组织方法，但由于热胰蛋白酶的不利影响，它产生的活细胞数量较少。相比之下，冷胰蛋白酶消化是胰蛋白酶消化的第二种方法，它涉及在用温胰蛋白酶孵育之前用 4 °C 的冷胰蛋白酶浸泡组织。这种方法不太有效，但它产生了大量的活细胞。因此，温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的主要区别在于温胰蛋白酶的用途和每种方法的重要性。