凝胶电泳和 SDS PAGE 的区别

什么是凝胶电泳

凝胶电泳是一种根据大分子片段（如 DNA、RNA 和蛋白质）的大小和电荷来分离它们的技术。在凝胶电泳期间，大分子在电场作用下在凝胶基质上移动，凝胶基质包含大分子移动通过的孔。凝胶电泳是分析来自 PCR、RFLP、克隆、DNA 测序或印迹技术的 DNA 的通用技术。纳米颗粒也可以通过凝胶电泳分离。凝胶刺是由来自海藻的称为琼脂糖的多糖制备的。琼脂糖凝胶由长链琼脂糖分子组成，它们以蜘蛛网的形式相互连接。视频 1 描述了琼脂糖凝胶的制备。

DNA 和 RNA 在它们的每个单体核苷酸处都含有磷酸基团。因此，它们在整个分子中具有相等的负电荷。此外，它们在电场作用下向正极迁移。迁移的速度取决于核酸的大小。较短的分子通过孔隙迁移得更快，而较大的分子则需要一些时间。

图 1：琼脂糖凝胶上的 DNA 条带

什么是 SDS 页

SDS PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种用于根据大小分离带电分子的分析技术。在此过程中，SDS 用于通过使蛋白质变性来分离蛋白质。由于 SDS 是一种去污剂；蛋白质的三级结构被它破坏，使折叠的蛋白质变成线性分子。此外，它用均匀的负电荷包覆该线性蛋白质分子。 SDS PAGE 由两种不同浓度的凝胶组成。顶层称为装载样品的浓缩胶，而底层称为分离胶。浓缩胶的聚丙烯酰胺浓度为3.5-4%（大孔径），将蛋白质浓缩在一个条带中。分离胶中的聚丙烯酰胺浓度为 4-20%（小孔径），它根据蛋白质的大小进行分离。视频 2 显示了 SDS PAGE 的制备。

SDS PAGE 提供蛋白质的快速分离，有助于后续分析，如蛋白质印迹。

图 2：SDS PAGE 上的蛋白质条带

由于 SDS PAGE 的分辨率高于常规琼脂糖凝胶，因此 SDS PAGE 有助于分离大小为 5-500 bp 的小 DNA 片段。

凝胶电泳和 SDS PAGE 之间的相似之处

定义

凝胶电泳： 用于根据大小和电荷分离大分子片段（如 DNA、RNA 和蛋白质）的技术

SDS 页： 一种用于根据大小分离带电分子的分析技术

作品

凝胶电泳： 在整个凝胶中相等；由琼脂糖组成

SDS 页： 两种不同浓度的凝胶；由聚丙烯酰胺制成

运行配置

凝胶电泳： 水平运行

SDS 页： 垂直运行

铸造方法论

凝胶电泳： 冷却后设置

SDS 页： 通过化学反应设置

毛孔大小

凝胶电泳： 孔径不均匀；琼脂糖浓度越高，孔径越小

SDS 页： 孔径均匀；丙烯酰胺与双丙烯酰胺的比例决定了孔径

专注

凝胶电泳： 0.5-2%

SDS 页： 6-15%

分离

凝胶电泳： 50-20, 000 bp 核酸

SDS 页： 5-250, 000 Da 蛋白质

状况

凝胶电泳： 一般在原生条件下运行

SDS 页： 变性条件

准备

凝胶电泳： 简单的

SDS 页： 一个复杂的过程

染色

凝胶电泳： 与溴化乙锭

SDS 页： 考马斯染色或银染

结论

凝胶电泳是一种分析技术，可根据大分子（如 DNA、RNA 和蛋白质）的大小进行分离。 SDS PAGE 是一种凝胶电泳，主要用于在变性条件下分离蛋白质。与常规凝胶电泳相比，SDS PAGE 具有更高的分辨率。凝胶电泳和 SDS PAGE 之间的主要区别在于分离的大分子的类型及其程序。

参考：

1. “凝胶电泳”。可汗学院，请点击此处2。 “SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)。” Diamantina Institute，2017 年 4 月 26 日，可在此处获取

图片提供：

1. “凝胶电泳 2” Von Mnolf – 通过 Commons Wikimedia 在奥地利因斯布鲁克拍摄的照片 (CC BY-SA 3.0) 2. Yikrazuul 撰写的“Coomassie3” – 通过 Commons Wikimedia 自己的作品 (CC BY-SA 3.0)