GFP和EGFP的区别
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这 主要区别 GFP 和 EGFP 之间是 GFP（代表绿色荧光蛋白）是一种在暴露于蓝光下时会显示出亮绿色荧光的蛋白质，而 EGFP（代表增强型绿色荧光蛋白）显示出比 GFP 更强的荧光。 此外，GFP 和 EGFP 之间的另一个重要区别是 GFP 是一种从维多利亚水母中分离的野生型蛋白质。但是，EGFP 是原始野生型的工程变体。
GFP 和 EGFP 是两种用作内部发色团的蛋白质。它们不需要任何辅助酶/底物、辅因子或基因产物来显示其颜色。因此，两者都被用作分子生物学中基因表达的报告者。
发色团、EGFP、GFP、绿色荧光、野生型蛋白
什么是 GFP
GFP（绿色荧光蛋白）是一种在蓝光或紫外光下发出绿色光的蛋白质。它自然存在于水母 Aequorea Victoria 中。 GFP由238个氨基酸组成。 GFP 的大小为 26.9 kDa。 GFP 是分子生物学中的一个强大工具，因为它的内在荧光没有任何辅助分子。荧光是由于蛋白质的连续氨基酸的共价重排。蛋白质折叠后，主链原子 Ser65、Tyr66 和 Gly67 在 O 存在下形成高度共轭的平面对羟基苯亚甲基咪唑啉酮发色团2.晶体结构研究表明，发色团在分子 β 桶结构的核心内的堆积可保护它免受顺磁性氧、水偶极子或顺反异构化的淬灭。此外，发色团与相邻分子的非共价相互作用增强了其光谱特性。
图 1：GFP 和荧光团的带状表示
GFP 可以在转基因修饰过程中引入生物体。它也可以世代相传。野生型 GFP 的主要缺点是蛋白质在细胞成像中的有效性降低，这是由于在生理温度（如 37°C）下折叠效率低，会降低荧光信号。此外，宿主细胞内 GFP 的成熟速度很慢，同时倾向于聚集。由于存在两种不同形式的生色团，可以观察到两个激发峰。然而，蛋白质工程通过引入野生型 GFP 的变体形式解决了大部分问题。
什么是绿色荧光蛋白
EGFP（增强型绿色荧光蛋白）是野生型 GFP 的变体，相对于 GFP 具有更高强度的发射。它是第一个也是最重要的 GFP 变体之一。 F64L 和 S65T 这两个突变在 37 °C 下产生具有更高折叠效率的 EGFP。有趣的是，由于 S65T 抑制了 395 nm 峰值，EGFP 在 ~490 nm 处具有单个激发峰，因为它调节附近 Glu222 的电离状态。另一方面，F64L 在 37 °C 时提高了折叠效率。重要的是，EGFP 的密码子序列针对在哺乳动物细胞中的表达进行了优化。
图 2：EGFP 表达
GFP 和 EGFP 之间的相似之处
GFP和EGFP的区别
定义
绿色荧光蛋白： 一种野生型蛋白质，在蓝光或紫外光下显示绿色荧光，天然存在于水母维多利亚水母中
绿色荧光蛋白： 相对于 GFP 具有更高强度发射的野生型 GFP 的变体
代表
绿色荧光蛋白： 绿色荧光蛋白
绿色荧光蛋白： 增强型绿色荧光蛋白
起源
绿色荧光蛋白： 野生型
绿色荧光蛋白： 突变体
64日 氨基酸
绿色荧光蛋白： 苯丙氨酸
绿色荧光蛋白： 亮氨酸
65日 氨基酸
绿色荧光蛋白： 丝氨酸
绿色荧光蛋白： 苏氨酸
颜色的亮度
绿色荧光蛋白： 亮绿色
绿色荧光蛋白： 更亮的绿色
激发峰
绿色荧光蛋白： 两个峰（395 nm 和 490 nm）
绿色荧光蛋白： 单峰 (490 nm)
37 °C 时的折叠效率
绿色荧光蛋白： 低的
绿色荧光蛋白： 高的
结论
GFP 是野生型蛋白质，当暴露于蓝光或紫外光时会显示出亮绿色荧光。 EGFP 是 GFP 的一种变体，与 GFP 相比，它表现出更高强度的荧光。因此，GFP 和 EGFP 之间的主要区别在于每种蛋白质发出的绿色荧光的强度。
参考：
1. Arpino, James A. J., 等。 “分辨率为 1.35 Å 的增强型绿色荧光蛋白的晶体结构揭示了 Glu222 的替代构象。” PLOS 医学，公共科学图书馆，journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0047132。
图片提供：
1. “Gfp 和荧光团”，作者 Raymond Keller（Raymond Keller（谈话）），由 Crystal Protein 赞助。 – 自己的作品（公共领域），来自 Commons Wikimedia 2。“Fgams ppat egfp puncta”，作者：Zhao A、Tsechansky M、Swaminathan J、Cook L、Ellington AD 等。 (2013) 瞬时转染的嘌呤生物合成酶形成应激体。 PLoS 一 8（2）：e56203。 doi:10.1371/journal.pone.0056203 (CC BY 3.0) 通过 Commons Wikimedia
