硝酸纤维素膜与尼龙膜的区别

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主要区别 硝酸纤维素膜和尼龙膜之间的区别在于 硝酸纤维素膜对蛋白质结合具有高亲和力,而尼龙膜对核酸结合具有高亲和力。 此外,疏水和静电相互作用将大分子结合到硝酸纤维素膜上,而离子、疏水和静电相互作用将大分子结合到尼龙膜上

硝酸纤维素膜和尼龙膜是大分子从凝胶转移到的两种类型的膜。然而,硝酸纤维素膜也可用于结合 DNA 和 RNA。

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什么是硝化纤维膜

由于高蛋白结合亲和力,硝酸纤维素膜是蛋白质印迹中常用的基质。然而,它可用于检测除固定蛋白和糖蛋白之外的核酸。大分子的固定主要通过疏水相互作用发生。膜的硝基和蛋白质的氨基酸侧链之间也形成氢键。蛋白质固定在高盐和低甲醇浓度下会很高。

图 1:印迹原理

硝化纤维素膜以 100% 纯硝化纤维素形式提供,具有高表面积且均匀。可用的预尺寸为 0.2 μm 和 0.45 μm。小孔径更适合与小蛋白质 (<14 kDa) 结合。蛋白质的结合和保留能力为80-250 μg/cm2.预组装的膜即可使用。硝酸纤维素膜的主要优点之一是其背景非常低,因为它很容易被阻塞。支持的硝酸纤维素膜可以被剥离和重新探测。

什么是尼龙膜

尼龙膜是一种广泛使用的用于结合核酸的基质。尼龙膜的机械强度比硝酸纤维素膜强。用于印迹的两种主要尼龙膜类型是 Biodyne A 和 Biodyne B。两种类型的孔径均为 0.45 μm。它们耐热和耐溶剂。此外,它们不会收缩、破裂或撕裂。两者的背景都比硝酸纤维素膜低。

图 2:Southern 印迹膜

硝酸纤维素和尼龙膜之间的相似之处

硝酸纤维素膜与尼龙膜的区别

定义

硝基纤维素膜是指在印迹中用于固定核酸和蛋白质的粘性膜,而尼龙膜是指用于固定大分子的一种具有高强度和耐热性的膜。

硝化纤维素膜由硝化纤维素制成,而尼龙膜由未改性或带正电荷的 Biodyne A 和 Biodyne B 尼龙制成。

毛孔大小

硝酸纤维素膜的孔径为0.2μm和0.45μm,而尼龙膜的孔径为0.45μm。

力量

硝化纤维素膜易碎,因此不可重复使用,而尼龙膜机械强度高。

传输方式

电泳转移主要用于将蛋白质转移到硝酸纤维素膜上,而毛细管转移是尼龙膜的常见做法。

亲和力

硝酸纤维素膜对蛋白质具有高亲和力,而尼龙膜对核酸具有高亲和力。硝酸纤维素膜也可用于核酸。

印迹

硝酸纤维素膜更适用于蛋白质印迹,而尼龙膜更适用于蛋白质印迹和蛋白质印迹。

绑定交互

疏水和静电相互作用将大分子结合到硝酸纤维素膜上,而离子、疏水和静电相互作用将大分子结合到尼龙膜上。

蛋白质结合能力

硝酸纤维素膜的蛋白结合能力为80-250 μg/cm2 而尼龙膜的蛋白结合能力为150-200 μg/cm2.

结论

硝酸纤维素膜是一种脆性膜,主要用于蛋白质印迹中固定蛋白质,而尼龙膜是一种强膜,主要用于固定核酸。硝化纤维膜通过疏水相互作用结合分子,而尼龙膜通过静电相互作用结合分子。因此,硝酸纤维素膜与尼龙膜的主要区别在于亲和力。

参考:

1. “用于蛋白质印迹的硝化纤维素膜 | Thermo Fisher Scientific – LK。” Thermo Fisher Scientific、Thermo Fisher Scientific,可在此处获得 2。 “Biodyne A 尼龙膜,0.45 m,8 Cm x 12 Cm。” Thermo Fisher Scientific、Thermo Fisher Scientific,可在此处获得 3。 “Biodyne B 尼龙膜,0.45 m,8 厘米 x 12 厘米。” Thermo Fisher Scientific、Thermo Fisher Scientific,可在此处获得

图片提供:

1. Gbdivers 的“印迹生物学” – 通过 Commons Wikimedia2 自己的作品 (CC BY-SA 3.0)。 Bojan Žunar 的“Southern 印迹膜” – 通过 Commons Wikimedia 自己的作品(CC BY-SA 4.0)

硝酸纤维素膜与尼龙膜的区别